Serological monitoring of antibodies for an early diagnosis ofaspergillosis in captive penguins / Monitoramento sorológico com detecção de anticorpos para diagnóstico precoce da aspergilose em pinguins em cativeiro

This study aimed to evaluate the efficacy of detection of anti-Aspergillus fumigatus antibodies in captive penguins by double radial agar gel immunodiffusion (AGID) for the aspergillosis diagnosis. We included 134 Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) in rehabilitation at the Center for Recovery of Marine Animals (CRAM / FURG). All of them were monitored by AGID weekly until its final destination (death or release), totalizing 660 serum samples studied. All animals were clinically accompanied and post-mortem examinations was performed in penguins that died during the studied period. A total of 28% (37/134) of the penguins died, 89.2% (33/37) due to aspergillosis, 11% (4/37) by other causes and 97 were released. From the 33 animals with proven aspergillosis, 21 presented anti- A. fumigatus antibodies by AGID, being the average interval between death and positive AGID 16.4 days. Twelve animals with negative serology died of aspergillosis. The sensitivity and specificity rates were 63.6% and 95% respectively, and the positive and negative predictive values were 80.7% and 88.9% respectively. These data demonstrate that the serological monitoring for detection of antibodies by AGID can be an important tool for the diagnosis of aspergillosis in penguins.

Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia da detecção de anticorpos anti- Aspergillus fumigatus em pinguins em cativeiro por imunodifusão radial dupla em gel de ágar (IDGA) para diagnóstico da aspergilose. Foram incluídos 134 pingüins de Magalhães (Spheniscus magellanicus) em reabilitação no Centro de Recuperação de Animais Marinhos (CRAM/FURG), que foram monitoradas por IDGA, semanalmente, até o seu destino final (morte ou de liberação), totalizando 660 amostras de soro estudadas. Todos os animais foram acompanhados clinicamente e exames post mortem foram realizados em pingüins que vieram a óbito durante o período de estudo. Um total de 28% (37/134) dos pinguins foram a óbito, 89,2% (33/37) de aspergilose, 11% (4/37) de outras causas, e 97 foram liberados. A partir dos 33 animais com aspergilose comprovada, 21 apresentaram anticorpos anti- A. fumigatus por IDGA, sendo o intervalo médio entre a morte e IDGA positivas 16,4 dias. Doze animais com sorologia negativa vieram a óbito por aspergilose. As taxas de sensibilidade e especificidade foram de 63,6% e 95%, respectivamente, e os valores preditivos positivos e negativos foram de 80,7% e 88,9 %, respectivamente. Estes dados demonstram que o monitoramento sorológico para detecção de anticorpos por IDGA pode ser uma ferramenta importante no diagnóstico de aspergilose em pinguins.

Efficacy of terbinafine and itraconazole on a experimental model of systemic sporotrichosis / Eficiência de terbinafina e itraconazol em um modelo experimental de esporotricose sistêmica

Itraconazole is currently considered the drug of choice to treat the diverse clinical presentation of sporotrichosis. On the other hand terbinafine by virtue of its excellent in vitro activity is under comparative evaluation for its therapeutic potential for a wide range of fungal infections. In this study, our aim was to determine the in vivo efficacy of terbinafine and itraconazole on a experimental model of systemic sporotrichosis. 120 rats Wistar received an injection of 2x10³ S. schenckii cells by via the lateral tail vein. After 3 days the animals were treated with terbinafine (250mg/kg) and itraconazole (100 mg/kg) and their respective diluents. In our model, terbinafine and itraconazole were effective in reducing the number of clinical lesions and positive organ cultures. There was statistical difference between the groups treated with the antifungals in relation to the control groups (p<0,05) concerning the clinical alterations, anatomic-pathological findings and in the positive organ cultures of the agent, being that the treated animals resulted in the absence and/or reduction of all the evaluated parameters. As for the treatments, terbinafine showed similar or higher activity that itraconazole in the evaluation of the testicle alteration (p=0,0004), as well as in the positive organ cultures of microorganism from the organ (p=0,0142). With these results it is possible to conclude that the antifungals studied are effective in the treatment of experimental systemic sporotrichosis.

Itraconazol é atualmente considerado a droga de escolha para o tratamento das diferentes formas clínicas da esporotricose. Por outro lado a terbinafina devido a sua excelente atividade in vitro está sendo avaliada quanto ao seu potencial terapêutico frente a diversas infecções fúngicas. O objetivo deste estudo foi determinar a eficácia in vivo da terbinafina e itraconazol em um modelo de esporotricose experimental sistêmica. 120 ratos Wistar receberam uma injeção de 2x10³ células de S. schenckii pela veia lateral da cauda. Após 3 dias os animais foram tratados com terbinafina (250mg/kg) e itraconazol (100mg/kg) e os seus respectivos diluentes. No modelo experimental estudado, a terbinafina e itraconazol se mostraram efetivos reduzindo o número de sintomas clínicos e retroisolamento positivo para o agente. Houve diferenças estatísticas entre os grupos tratados com os antifúngicos em relação aos grupos controle (p<0,05) nas alterações clínicas, achados anatomopatológicos e no retroisolamento do agente, sendo que os animais tratados resultaram na ausência e/ou diminuição de todos os parâmetros avaliados. Quanto aos tratamentos a terbinafina se mostrou com atividade similar ou superior ao itraconazol quando avaliado as alterações anatomopatológicos do testículo (p=0,0004), assim como no retoisolamento do órgão (p=0,0142). Com estes resultados permite-se concluir que os antifúngicos estudados são efetivos no tratamento da esporotricose sistêmica experimental.

Aspergillosis: a limiting factor during recovery of captive magellanic penguins

The article describes the epidemiology, macroscopic and histological lesions as well as the isolation of Aspergillus flavus and A. fumigatus from Magellanic penguins (Spheniscus magellanicus) during recovery in the Center for Recovery of Marine Animals (CRAM - 32°S/52°W), over a period of two years. From January 2004 to December 2005 the Center received 52 Magellanic penguins, and 23 percent (12/52) died. Necropsies were performed and tissue samples were collected for histological and microbiological examination. From 12 dead animals, aspergillosis was confirmed in five animals, corresponding to 42 percent of the mortality. Granulomatous nodules were observed mainly on air sacs and lungs. Histologically, septate and branching hyphae, measuring 3-5 æm and PAS positive were found. Two of these cases were caused by A. fumigatus, two other by A. flavus, and in one the diagnostic was established by macroscopic lesions observed in the necropsy without sample collection for fungal isolation and identification. The five aspergillosis cases occurred in the first year of the study, when a disinfection program was not yet established in the CRAM. This paper points out the importance of aspergillosis in the rehabilitation process of captive penguins, and emphasize the necessity of an environmental disinfection on the aspergillosis prevention, mycosis that caused a high rate of mortality of the seabirds found on the Brazilian coast and admitted in the CRAM.

O trabalho descreve fatores epidemiológicos, achados de necropsia, histológicos e o isolamento de Aspergillus flavus e A. fumigatus em pingüins-de-Magalhães (Spheniscus magellanicus) em reabilitação no Centro de Recuperação de Animais Marinhos (CRAM - 32°S/52°W), durante um período de dois anos. De janeiro de 2004 a dezembro de 2005 foram recebidos no Centro, 52 pingüins-de-Magalhães, dos quais 23 por cento (12/52) morreram. Esses animais foram necropsiados e amostras de tecidos foram coletadas para exame histológico e microbiológico. De 12 animais necropsiados, aspergilose foi diagnosticada em 42 por cento (5/12). Granulomas foram observados principalmente em sacos aéreos e pulmões e hifas septadas, hialinas e dicotômicas em ângulo agudo foram encontradas na histologia. Dois casos foram ocasionados por A. fumigatus, outros dois por A. flavus e em um caso o diagnóstico foi estabelecido pelas lesões macroscópicas observadas na necropsia, sem a coleta de amostra para isolamento e identificação fúngica. Os cinco casos da micose ocorreram no primeiro ano, período em que não havia um programa de desinfecção no Centro. Este trabalho ressalta a importância da aspergilose interferindo no processo de reabilitação de pingüins em cativeiro no CRAM, e enfatiza a necessidade da desinfecção ambiental na prevenção da micose, doença que causa uma alta taxa de mortalidade de aves marinhas encontradas na costa brasileira e encaminhadas ao CRAM.

Efeitos de doses elevadas da terbinafina e itraconazol em ratos Wistar / Effects of high doses of terbinafine and itraconazole in Wistar rats

Levando em consideração a importância do itraconazol e da terbinafina na terapia antifúngica, o estudo tem como objetivo avaliar os efeitos de altas doses de itraconazol (100 mg/kg) e terbinafina (250 mg/kg) em ratos albinos wistar através das análises das enzimas hepáticas (ALT e ALP), hemograma completo e estudo histopatológico de diferentes órgãos. Os fármacos foram administrados pela via oral, uma vez ao dia, por um período de 30 dias, quando foi coletado sangue e realizado a necrópsia dos animais experimentais. Os valores detectados das enzimas hepáticas e do hemograma foram compatíveis aos índices fisiológicos para a espécie estudada não sendo observadas diferenças estatísticas entre os grupos experimentais. A histopatologia não revelou nenhuma anormalidade, porém 25 por cento dos animas tratados com terbinafina morreram imediatamente após a administração do fármaco. Com esses resultados concluiu-se que as doses administradas dos fármacos não alteraram as enzimas hepáticas avaliadas, assim como o hemograma, sendo, no entanto, necessários mais estudos que possibilitem considerar doses elevadas da terbinafina e itraconazol como alternativa terapêutica viável para o tratamento de micoses sistêmicas.

Taking into account the importance of the itraconazole and terbinafine in the antifungal therapy, the study has as objective evaluate the effects of high itraconazole doses (100 mg/kg) and terbinafine (250 mg/kg) in rats albino Wistar through the analyses of the hepatic enzymes (ALT and ALP), complete blood count and histopathologic study of different organs. The drugs were administered orally once a day, for a period of 30 days, when blood was collected and accomplished the necropsy of the experimental animals. The detected values of the hepatic enzymes and of the blood count were compatible to the physiologic indexes for the studied species with no statistical differences among the experimental groups. The histopathologic exam did not reveal any abnormality, however 25 percent of the treated with terbinafine died immediately after the administration of the drug. With those results we concluded that the administered doses of the drugs did not alter the appraised hepatic enzymes, as well as the blood count. However, more studies are needed to consider high doses of the terbinafine and itraconazole as viable treatment alternative for systemic mycosis.